PCR實(shí)驗(yàn)也能翻車？這些方法來解決
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是分子生物學(xué)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一，但如果忽略了其中的一些要點(diǎn)，即使是實(shí)驗(yàn)室里的大神，也會(huì)遇到目的序列擴(kuò)增不出的情況。PCR 的成功與否與模板、引物、DNA 聚合酶及其他反應(yīng)組分、反應(yīng)條件這四大要素緊密相關(guān)，今天我們就一起梳理下 PCR 失敗的主要原因和對(duì)策吧！
PCR成功的四大要素及注意事項(xiàng)
1
模板（點(diǎn)擊下方文字展開查看解決方案）
2
引物（點(diǎn)擊下方文字展開查看解決方案）
3
DNA聚合酶及其他反應(yīng)組分
（點(diǎn)擊下方文字展開查看解決方案）
4
反應(yīng)條件（點(diǎn)擊下方文字展開查看解決方案）
可見在一個(gè)成功的 PCR 實(shí)驗(yàn)里，模板、引物、DNA 聚合酶、反應(yīng)條件這四個(gè)要素缺一不可，尤其對(duì)于一些保真度要求高的長片段、或是一些高 GC 含量的復(fù)雜模板，選擇一款合適的 DNA 聚合酶又起到至關(guān)重要的作用。
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參考文獻(xiàn)
Zhao Z., Xie X., Liu W., Huang J., Tan J., Yu H., Zong W., Tang J., Zhao Y., Xue Y., Chu Z., Chen L., and Liu Y.-G. (2022). STI PCR: an efficient method for amplification and de novo synthesis of long DNA sequences. Mol. Plant. doi: https://doi.org/10.1016/j.molp.2021.12.018.
